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Objetivo. Determinar la asociación entre la práctica de la prueba de papanicolaou y el estres laboral en personal de enfermería de Zacatecas, México. Material y métodos. El estudio fue descriptivo – correlacional, comparativo y de corte transversal, la muestra estuvo conformada por 99 enfermeras del primer nivel de ateción a la salud de Zacatecas, México. Se aplicó la escala Nursing Strees Scale (NSS) diseñada por Gray-Toft& Anderson (1981) y una cédula de datos personales y ginecológicos. El estudio se apegó a lo dispuesto en Ley General de Salud en Materia de Investigación para la Salud en Seres Humano (2014). Resultados. Un 83.8% se ha realizado su papanicolaou alguna vez en la vida, mientras que en los últimos tres años las enfermeras se la realizaron en promedio solo una vez. Un 62.6% de las enfermeras presentó estrés agudo y un 37.4% presentó estrés crónico.Un 60.2% de las enfermeras que se practicaron su prueba de papanicolau presentaron estrés agudo, mientras que un 39.8% de las enfermeras que también se la practicaron presentarón estrés crónico, a comparación de un 75% de las enfermeras que no lo presentaron (x²=1.248, p = .264). No se encontró diferencia estadísticamente significativa entre la práctica de la prueba de papanicolaou y estrés laboral de acuerdo a características socio demográficas y laborales (p>.05). Tampoco existieron diferentes estadísticamente significativas entre el estrés laboral y la práctica de la prueba de papanicolaou (p>,05). Conclusiones. Existen otros factores personales como la falta de interes en el autocudado a la salud.