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Dentre as doenças virais, a infecção crônica causada pelo vírus da hepatite B é a mais prevalente nos seres humanos, sendo considerada um relevante problema de Saúde Pública, tanto no Brasil quanto no mundo. O objetivo desse estudo foi de identificar o conhecimento que os alunos do curso técnico de em enfermagem do interior do estado São Paulo-Brasil, tem quanto à importância da vacinação da hepatite B e do teste reagente do Anti HBs para trabalhar na saúde com segurança. Metodologia pesquisa quantitativa e transversal, que foi desenvolvida por meio de entrevistas com alunos de uma escola técnica Estadual, após ser aprovado pelo Comitê de Ética e Pesquisa com Seres Humanos da Universidade Paulista-UNIP. Resultado demonstrou que os alunos consideram a vacinação elemento relevante para trabalhar com segurança, no entanto, a maioria desconhece as doses necessárias para a imunização. Um número relevante de alunos também não conhece o nome do teste que indica a imunização, apesar de citarem a sua importância devido os riscos ocupacionais inerentes ao ambiente de trabalho. Conclui-se que é necessário realizar um aprimoramento na disciplina, uma vez que existem falhas no conhecimento dos alunos de nível técnico que, apesar de já terem tido a matéria sobre a temática, não tem clareza sobre algumas especificidades relacionadas a hepatite B.